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全自动标本处理系统在临床微生物检验中的应用(2)
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摘要:表1 两种接种方法均阳性的标本接种效果的比较个)项目n单个菌落数仪器法手工法尿.血/无菌体液.合计.:P 2.3 两种接种方法的接种阳性率比较 219例尿阳性培
表1 两种接种方法均阳性的标本接种效果的比较个)项目n单个菌落数仪器法手工法尿.血/无菌体液.合计.:P<0.05,与手工法比较。
2.3 两种接种方法的接种阳性率比较
219例尿阳性培养标本和120例血阳性培养标本经两种接种方法接种得到一致的阳性率,均为100%。930例标本中,仪器法和手工法的接种阳性率为分别是37%和38%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05),见表2。
表2 930例标本两种接种方法阳性率的比较(n)项目手工法阳性(+)阴性(-)合计仪器法 尿阳性(+) 血阳性(+) 尿阴性(-) 血阴性(-)000合计
2.4 两种接种方法的尿培养结果比较
手工法接种的标本中,菌落总数大于或等于105cfu/mL和大于或等于104cfu/mL的标本都要比仪器法接种的多,菌落总数大于或等于102cfu/mL的标本却比仪器法少;从分离得到的菌种数来看,手工法接种分离到1种或大于2种菌的标本要比仪器法多,而分离到2种菌却比仪器法少,见表3。
表3 两种接种方法的尿培养结果比较(n)项目尿仪器法手工法血/无菌体液仪器法手工法菌落总数 ≥105cfu/mL6 ≥104cfu/mL ≥102cfu/mL续表3 两种接种方法的尿培养结果比较(n)项目尿仪器法手工法血/无菌体液仪器法手工法菌种数 1种15 2种 >2种
3 讨 论
微生物检测流程的复杂性使临床微生物实验室的自动化、智能化建设滞后于其他专业[6]。在广州医科大学附属第三医院,实习生和进修生参与了大量标本接种的工作,因人员长期轮换且水平不一,很难实现标准化的操作。接种是微生物检测流程的第一步,有无菌生长、菌落计数及菌种数直接影响检验人员对后续实验的判断。因此,确保微生物检验的质量,必须尽可能实现标准化的操作。
2015年,广州医科大学附属第三医院实验室使用我国第1台BD Kiestra InoqulA全自动标本处理系统。该仪器能通过自动识别标本类型、自动选择培养皿种类、自动贴标签、自动取样,并通过磁珠在磁场的作用下进行划线接种。近几年国内几家医院和第三方检测平台华银也陆续装上了Kiestra InoqulA,甚至包含了自动孵育系统和数字成像系统,实现了微生物检验全程自动监测。在国外,从2014年至今已有不少BD Kiestra应用的相关报道[8-10],但在国内尚无报道。FROMENT等[11]在2014年报道了BD Kiestra InoqulA在无交叉污染的情况下产生令人满意的分离效果,比手工接种分离到了更多菌种类型。MORENO等[12]研究表明BD Kiestra InoqulA比传统方法分离出更多的单个菌落。IVERSEN等[13]通过与Copan WASP对比,发现对于大于或等于105cfu/mL的尿标本,BD Kiestra有更高的分离率;在单个菌落上,后者同样拥有更出色的分离效果。CROXATTO等[14]报道BD Kiestra InoqulA对于浓度大于107cfu/mL的标本也能分离出单个菌落,且比Copan WASP和手工接种分离得到更多的菌种,同时减少了实验室的工作量与工作成本。甚至有研究发现,使用BD Kiestra InoqulA后,有更多的阴道加德纳菌和放线菌从尿标本种分离出来[15]。
本实验经仪器接种的标本所得单个菌落数远高于手工接种。图1可见无论是尿标本“Z”字型划线还是血/无菌体液四区划线,都能清晰美观地分离出不少单个菌落,避免了手工接种的参差和随意。分区划线的目的是为了分离出单个菌落,有无分出及分离的质量,直接关系后续实验的进程。本研究发现219例尿液标本经两种接种方法接种均阳性,而8例仪器法阳性而手工法阴性的标本中,6例均为菌落总数大于或等于102cfu/mL(平板上只有1个或少数几个菌落生长),对于耻骨上膀胱穿刺采集、膀胱导尿采集及经前列腺按摩后排尿采集的尿液标本,菌落总数达到大于或等于102cfu/mL需要做鉴定或(和)药敏试验[16],这或许是仪器优越性能的体现;12例仪器法阴性而手工法阳性的标本中,1例大于或等于102cfu/mL,6例大于或等于104cfu/mL,5例大于或等于105cfu/mL。不可置否的是,仪器法采用经校准的加样枪和配套带滤芯的枪头加样,和手工法的一次性定量接种环相比,其拥有更精确的加样量。加之手工加样涉及手工开关标本管、手工接种及划线分离等可能出现错误的步骤。故手工法比仪器法多出4例的阳性或许跟上述原因有关。尽管两种方法的阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05),但由于尿培养后续的鉴定及药敏试验跟菌落总数和菌种类别及菌种数直接相关,故保证加样量、实行标准化操作必不可少。否则,个别报告的过度药敏试验或漏报,将影响临床的诊疗决策。在分离的菌落总数和菌种数方面,其中两例标本经仪器法接种后,通过单个菌落更容易识别出有两种菌生长,挑取单个菌落质谱鉴定确认为两种菌,而手工法分不出单个菌落。对于阳性血培养来说,第一时间识别出菌种的数量和种类,方能及时把一级报告反馈给临床。假设能做到采血量准确、严格把控上机时间,那么通过标准化的标本处理得到的总菌落计数可以对血流感染的动态监测起到更准确的指导意义。
文章来源:《自动化与仪器仪表》 网址: http://www.zdhyyqybzz.cn/qikandaodu/2021/0718/846.html
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